돈 루이스 데 안테사나(Don Luis de Antezana)와 도냐 이사벨 데 구스만(Doña Isabel de Guzmán) 부부에 의해 설립되었다. 스페인에서 가장 오래된 병원 중 하나로, 설립 당시 현대적인 병원을 목표로 했다.

알칼라 대학(Universidad de Alcalá)이 설립된 후, 의과대학 교수들이 의사와 외과 의사로 활동하며 대학 병원의 기능을 수행했다. 학생들은 1540년부터 1830년까지 이곳에서 해부학 실습 및 절개를 진행하여, 스페인 최초의 대학 병원으로 여겨진다.

일부 자료에 따르면 1520년(다른 자료에서는 1573년)에 민간 간호사 단체가 창설되어, 간호 전문화의 선구적인 역할을 했다. 이 전통은 현재의 노인 요양 시설로 이어지고 있다.

예수회의 창립자인 이냐시오 데 로욜라 성인이 알칼라 데 에나레스에서 학생으로 머무는 동안 이 병원에서 거주하며 요리사 및 간호사로 봉사했다. 이곳에서 그의 초기 동료 및 추종자들과 처음으로 함께 생활하며 예수회의 씨앗을 뿌린 것으로 알려져 있다.

이곳에서 활동한 인문주의 의학자들은 가난한 이들을 치료하며 얻은 경험을 바탕으로 유럽 전역에 출판된 의학 서적에 기여했다. 또한 스페인 군주의 시의(侍醫)나 카스티야의 수석 의사(protomédico)를 배출하기도 했다.

현재는 안테사나 재단(Fundación Antezana)에 의해 원호 생활시설(노인 요양 시설)로 운영되고 있으며, 동시에 황금세기 의학 박물관(Museo de la Medicina del Siglo de Oro)으로서 역사적인 공간을 방문객에게 개방하고 있다.